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我們經(jīng)常都說蛋白純化,它具體有什么作用?

發(fā)表時(shí)間:2022-10-06 訪問次數(shù):2472

  目前的生物行業(yè)發(fā)展可謂是紅紅火火,幾乎成為全球矚目的熱點(diǎn),甚至喬布斯都預(yù)言:下一個(gè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的爆點(diǎn)必然是生命大健康行業(yè)。而隨著人們生活水平的不斷提高,人們對健康的渴望也變得越發(fā)迫切起來。但是,我們每天都在說蛋白純化,但是,奇怪的是我們好像日常用不上它,它到底是用來干嘛的呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。

  其實(shí)蛋白純化技術(shù)在生物化學(xué)領(lǐng)域有著重要的作用,也是使用最為廣泛且重要的技術(shù)之一。打個(gè)比方,一個(gè)真核細(xì)胞可以產(chǎn)生數(shù)以千計(jì)的蛋白,這些蛋白的作用可謂千奇百怪,而且含量也是各不相同,有的蛋白含量很高,有的甚至只有幾個(gè),而且這些蛋白之間會相互影響,所以,如果我們想要研究某個(gè)蛋白的特性,就需要將其中的蛋白和非蛋白分離出來,這個(gè)過程也就是我們常說的蛋白純化。

  蛋白純化的方法介紹:

  一、根據(jù)溶解質(zhì)不同的分離方法

  1、鹽析法。簡單來說,不同蛋白會隨著鹽濃度的不同而溶解度變化的情況,也就是我們常說的巖溶。當(dāng)鹽濃度持續(xù)升高時(shí),蛋白的溶解度會出現(xiàn)不同程度的下降并析出,這個(gè)現(xiàn)象就稱之為鹽析;

  2、等電點(diǎn)沉淀法。不同蛋白在經(jīng)典狀態(tài)下的斥力最小,溶解度也最小,也就是說,而不同蛋白的等電點(diǎn)是不同的。所以,我們可以通過調(diào)節(jié)溶劑的PH值,使得其達(dá)到某一蛋白的等電點(diǎn),而造成沉淀的現(xiàn)象。只是,如果單獨(dú)的使用這個(gè)方法效率較高,我們通常會結(jié)合鹽析法來使用以提交其效率;

  3、低溫有機(jī)溶劑沉淀法。在溶液中添加甲醇、乙醇或丙酮等有機(jī)溶劑,當(dāng)達(dá)到一定的濃度后,可以造成一些蛋白溶解析出(PS:這個(gè)方法雖然在效果上要優(yōu)于鹽析法,但是容易造成蛋白變質(zhì),需在低溫環(huán)境下使用);

  二、根據(jù)分子大小的分離方法

  1、透析、超濾。其實(shí)就是采用半透膜將大小不同的蛋白質(zhì)分開的方法。當(dāng)然了,如果覺得透析的速度太慢,可以考慮采用超濾的方式,也就是采用高壓或離心機(jī)的原理,使得水和小分子強(qiáng)行通過半透膜,留下我們需要的蛋白產(chǎn)品的方式;

  2、凝膠過濾法。有可以稱之為分子篩層析法。它是根據(jù)分子大小進(jìn)行分離的方式,采用填料葡萄糖凝膠和瓊脂糖凝膠的方式;

  三、根據(jù)蛋白帶電性質(zhì)不同進(jìn)行分離

  1、電泳法。不同蛋白在同一PH環(huán)境下的電量不同,使得其在遷移時(shí)分部會變得不同。所以,我們可以采用這個(gè)方式對其進(jìn)行分離;

  2、例子交換層析法。用例子交換層析柱對蛋白溶液進(jìn)行分離時(shí),會將帶有與離子交換劑相反的蛋白吸附出來,然后再采用改變PH值或是離子強(qiáng)度的方法將蛋白洗脫下來;

  四、根據(jù)蛋白特異性的分離方法

  也就是親和色譜法,其實(shí)就是一套多種方法的聯(lián)合使用方式。通過對組織搗碎、超聲波處理、反復(fù)凍融,最后通過化學(xué)處理方法的方式,后面我們會和大家具體聊聊有關(guān)這個(gè)方法的詳細(xì)過程,在這里我們就不一一贅述了;

  總的來說,無論采用那種方法,都需要結(jié)合蛋白的特性來挑選合適的方法,這樣不僅能提純出我們需要的蛋白產(chǎn)品,更是能夠在極大程度上節(jié)約我們的處理時(shí)間和物料投入。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。