抗體提純在抗體應(yīng)用中是非常重要的一種手段，它能夠有效提升抗體的特性，降低所產(chǎn)抗體的副作用。所以，抗體純化操作具備非常重大的意義。而每個(gè)企業(yè)在生產(chǎn)工藝、技術(shù)水平等方面存在極大的差異，所以純化方法也是各不相同。不過(guò)總體算來(lái)主要有親和層析法、離子交換層析法、尺寸排阻色譜法以及殊死作用色譜法。今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊這四種方法。

　　1、親和層析法

　　親和純化是一種通過(guò)可逆反應(yīng)達(dá)到分離純化的技術(shù)，更適合用來(lái)從成分復(fù)雜并且雜質(zhì)的含量要遠(yuǎn)高于目標(biāo)蛋白的提純。先通過(guò)瓊脂糖與介質(zhì)進(jìn)行偶聯(lián)，使得其結(jié)合成為具備相關(guān)特異的介質(zhì)，然后通過(guò)配體進(jìn)行選擇性地吸附，再通過(guò)平衡液清洗掉雜質(zhì)，從而提取到我們需要的目的抗體;

　　2、離子交換層析法

　　這個(gè)方法的原理是利用帶有電荷的溶質(zhì)分子，通過(guò)其與帶有相反電荷的固定化離子交換基團(tuán)之間發(fā)生可逆的相互作用?？贵w本身就是一種蛋白，它可以在一定PH值的緩沖液中點(diǎn)解成離子，我們可以通過(guò)鄧店點(diǎn)pl來(lái)進(jìn)行離子交換層析實(shí)驗(yàn)，提取出該層的離子后，再通過(guò)改變緩沖液的PH值分離出目標(biāo)蛋白的目的;

　　3、尺寸排阻色譜法

　　這個(gè)分離方法相對(duì)溫和，所選尺寸排阻的分離原理主要取決于分子其在溶液中的體積。當(dāng)我們將溶液加入純化柱時(shí)，其分子會(huì)按照其尺寸進(jìn)行從大到小地分離。分子小的流動(dòng)速度相對(duì)緩慢，大的分子會(huì)被快速排出。所以，通過(guò)分子的大小進(jìn)行純化，就能夠進(jìn)行有效且快速地篩選;

　　4、疏水作用層析法

　　疏水作用層析法其實(shí)就是利用鹽-水體系中疏水基團(tuán)和層析介質(zhì)的疏水配基之間疏水力的不同而進(jìn)行分離的一種層析方法。這種方法就是利用變形后的蛋白暴露出的疏水殘基，或者在高鹽環(huán)境下暴露于分子表面的疏水殘基，依次用從高至低離子強(qiáng)度洗脫液將疏水用作由弱至強(qiáng)的組分進(jìn)行分離的方式;

　　或許又有人要問(wèn)了：這四種蛋白純化方法，哪種方法更好呢?總的來(lái)說(shuō)，這四種方法各有優(yōu)勢(shì)，當(dāng)然也各有不足之處，需要結(jié)合抗體的來(lái)源、時(shí)間需求、成本預(yù)算以及抗體用途等一系列的需求進(jìn)行考慮，選擇一種最適合的蛋白純化方式。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。