基因工程技術(shù)作為現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的核心,被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、環(huán)境、能源、醫(yī)藥以及農(nóng)牧業(yè)等領(lǐng)域。其關(guān)鍵技術(shù)是DNA的連接和重組,而在此過程中發(fā)揮重要作用的就是核酸工具酶。
核酸工具酶種類繁多、功能各異,主要包括限制酶、聚合酶、連接酶、修飾酶和核酸酶等。這些酶具有特異性的序列識別能力以及高效的催化活性,在一定的條件下可以對核酸進行切割、連接、擴增及修飾等,反應(yīng)條件溫和且具有出色的生物相容性,因此,被廣泛地應(yīng)用于核酸、蛋白質(zhì)和小分子等生物活性分子的分析檢測。
具體的各種酶的功能,大家應(yīng)該都比較清楚(不清楚的請去留言),這里不過多贅述,我們聊聊大家比較關(guān)心的問題——酶能不能達到預(yù)期效果。別人的不清楚,我們普健自產(chǎn)的幾個核酸工具酶,效果還是不錯的。
核酸工具酶
重點推薦
AtaGenix 全能核酸酶?
Benzonase Nuclease全能核酸酶,是一種經(jīng)過基因工程改造的核酸內(nèi)切酶。它能夠在非常廣泛的條件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀或超螺旋形式)DNA和RNA。全能核酸酶不特異性識別堿基序列,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進行切割,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
產(chǎn)品優(yōu)勢
經(jīng)長期項目檢驗,純化中可有效降低蛋白樣品粘度,去除蛋白樣品中核酸的污染。
試劑兼容性高,可用于去除細(xì)胞、病毒等實驗中的核酸,也可用于去除生化分析樣品中的核酸。
高效的核酸消化能力,酶活>800U/μL,比活>1.0×106U/mg,降解所有形式的DNA和RNA。
嚴(yán)格質(zhì)控,每個批次產(chǎn)品均經(jīng)過活性和功能驗證,保證產(chǎn)品質(zhì)量。
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AtaGenix Benzonase Nuclease全能核酸酶
Taq DNA Polymerase?
Taq DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶和微弱的5'→3'核酸外切酶的能力,但沒有3'→5'外切酶的能力,這意味著在3'末端會出現(xiàn)一個dA突出。利用該特性,它可被用于TA克隆。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase?
末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT),是一種模板依賴的 DNA 聚合酶,可以催化在寡核苷酸、單鏈或雙鏈DNA的 3’羥基端加上dNTP,最短可催化3個核苷酸長度的寡核苷酸。
我們還有另一類工具酶
蛋白工具酶
這類蛋白研究工具酶是由普健生物經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,具有識別特異性氨基酸序列位點,并將對應(yīng)蛋白標(biāo)簽切割下來的作用。
IdeS Protease
產(chǎn)品優(yōu)勢
IdeS具有獨特的底物選擇性,高度特異性的IgG切割,快速生成高純度的片段,可以作為工具酶應(yīng)用于抗體類藥物或抗體融合蛋白藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。
高純度:可溶性高效表達,宿主蛋白殘留低,純度>95%;
高穩(wěn)定性:嚴(yán)格質(zhì)控,每批產(chǎn)品均經(jīng)過活性和功能驗證,保證產(chǎn)品質(zhì)量;
高酶活:酶活>20U/ul,可以特異性的酶切IgG抗體獲得所要的抗體片段;
無動物源性:重組表達,全程未使用任何動物源原料,無外源性病毒污染。
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IdeS Protease——特異性切割I(lǐng)gG,一個挑剔的工具酶
TEV Protease?
高活性、高特異性,去標(biāo)簽首選
TEV蛋白酶(重組型)是經(jīng)基因工程改造后的重組蛋白酶,可特異性識別Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,它與腸激酶 、凝血酶、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性和高特異性的雙重特點,已成為融合蛋白表達后去除標(biāo)簽的首選蛋白酶。
?rb-EK
高專一性、高效酶切、比活性高
重組牛腸激酶(rb-EK)是一種絲氨酸蛋白水解酶,能高效專一地識別蛋白質(zhì)中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C端水解肽鍵,產(chǎn)生切割,在生物體內(nèi)水解胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐鹊鞍酌浮S捎谀c激酶具有高度專一性和高效酶切特性,廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)。天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和1 條35 kDa的輕鏈組成,重鏈起錨定細(xì)胞膜的作用,輕鏈具有全酶完整的催化活性。普健生物表達的牛腸激酶輕鏈活性核心區(qū)域,比活性更高,特別適用于基因工程融合蛋白的酶切。
?PNGase F
PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一種酰胺水解酶,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖及雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。PNGase F不會去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
?3C Protease
3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶,在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著重要作用。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性,能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵,識別位點為 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。普健生物將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因在大腸桿菌中進行表達,純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶,該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點的融合蛋白,具有良好的生物學(xué)活性。同時,普健生物自產(chǎn)的3C蛋白酶融合有GST標(biāo)簽蛋白,有利于后期將其從酶切體系中去除。
?SUMO Protease
SUMO蛋白酶識別完整的含100個氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)標(biāo)簽蛋白,并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。與EK和TEV等蛋白酶的識別位點相比,由于其識別序列長,所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性,且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力,例如溫度(4-37℃)等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽,便于使用親和層析的方法,去除SUMO蛋白酶,純化目的蛋白。本產(chǎn)品經(jīng)驗證在 TBS pH 8.0 和 PBS pH 7.5 反應(yīng)體系中均可使用。
AtaGenix現(xiàn)有工具酶
貨號 |
工具酶 |
ATE00001 |
TEV Protease |
ATE00002 |
rb-EK |
ATE00003 |
3C Protease |
ATE00004 |
SUMO Protease |
ATE00005 |
PNGase F |
ATE00006 |
Taq DNA Polymerase |
ATE00008 |
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase |
ATE00009 |
Benzonase Nuclease |
ATE00010 |
IdeS Protease |