對(duì)單克隆抗體和多克隆抗體有一定的了解后,我們又發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的詞:抗體庫(kù),也有稱之為抗體文庫(kù)的。因?yàn)樵谏婕笆删w展示技術(shù)的時(shí)候,常常會(huì)提到一個(gè)詞:噬菌體展示文庫(kù)。以前一直不明天,為什么要這么表述。有鑒于此,今天普健生物就和大家一起學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)。
首先,什么是抗體庫(kù)?
顧名思義,抗體庫(kù)指的就是機(jī)體在受到抗原刺激后,產(chǎn)生的一系列特異性抗體的總和。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是某種抗原刺激機(jī)體后,會(huì)產(chǎn)生各類抗體,這些抗體的混合物則被稱為抗體庫(kù)。
噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建流程為何?
1、提取RNA。通過(guò)離心、震蕩、靜置等一系列的手段,提取無(wú)RNA酶的RNA;
2、反轉(zhuǎn)錄。將提取出來(lái)的RNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄的方式,獲得cDNA;
3、抗體片段擴(kuò)增。通過(guò)反轉(zhuǎn)錄cDNA中擴(kuò)增特定的抗體片段,對(duì)其進(jìn)行片段擴(kuò)增;
4、克隆到噬菌體上。將擴(kuò)增所得的多樣DNA進(jìn)行抗體基因序列和噬菌體載體的酶切,將所需片段克隆到噬菌體質(zhì)粒上;
5、轉(zhuǎn)化菌庫(kù)。通過(guò)對(duì)其連接產(chǎn)物進(jìn)行電轉(zhuǎn)和培養(yǎng)后,獲得菌庫(kù);
6、擴(kuò)增并純化。將上一步的菌體混合物進(jìn)行培養(yǎng)后,通過(guò)相關(guān)操作對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增和純化,最終獲得數(shù)量足夠的抗體庫(kù);
當(dāng)然了,如上我們也只是和大家簡(jiǎn)單聊了一下大概的步驟,真是操作的復(fù)雜程度非一兩句可以描述得了的。如果您有興趣,可以在我們之前發(fā)布的文章“納米抗體之噬菌體文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程詳解”中進(jìn)行詳細(xì)了解。當(dāng)然了,如果您想要構(gòu)建噬菌體抗體庫(kù),您也可以直接聯(lián)系普健生物,我們擁有15年蛋白抗體制備經(jīng)驗(yàn),為您提供最優(yōu)質(zhì)的服務(wù),歡迎您的來(lái)電咨詢。
本文網(wǎng)址:http://m.mamaskitchenca.com/archive/614.html,轉(zhuǎn)載請(qǐng)標(biāo)明出處!