所謂的細(xì)胞培養(yǎng)，指的是通過體外培養(yǎng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分裂等生理狀態(tài)的過程。即在無菌條件下，從機(jī)體中提取細(xì)胞，并讓其在模擬體內(nèi)環(huán)境下繼續(xù)生存、生長(zhǎng)且繁殖的過程。通過細(xì)胞培養(yǎng)，我們可以獲得大量、性質(zhì)相同的細(xì)胞從而進(jìn)行抗體蛋白等產(chǎn)品的制備。那么，細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟是怎樣的呢?今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊。

　　1、細(xì)胞傳代

　　當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到80-90%時(shí)，吸出培養(yǎng)液，再加入PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，吸出PBS后加入胰酶放入培養(yǎng)箱。具體的消化時(shí)間因細(xì)胞而異，而后通過吹打細(xì)胞使之脫落，并盡量讓其保持單科細(xì)胞的懸浮液。之后，再通過離心機(jī)離心，吸出上清液并丟棄。最后再加入到培養(yǎng)基，補(bǔ)足培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)即可;

　　2、細(xì)胞換液

　　吸出原培養(yǎng)液，并加入PBS混合后晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，潤(rùn)洗細(xì)胞后吸出PBS。而后加入含新鮮血清的培養(yǎng)基，最后繼續(xù)培養(yǎng)即可;

　　3、細(xì)胞凍存

　　按照7:2:1的比例加入培養(yǎng)基、血清、DMSO配置好凍存液，而后將其至于室溫中備用。將細(xì)胞制備成懸液，通過離心機(jī)去除上清液加入凍存液后搖勻。將所得混合液均勻分裝，密封后選擇合適溫度凍存;

　　4、細(xì)胞復(fù)蘇

　　去除凍存的細(xì)胞，至于37度熱水中解凍。在解凍過程中，需要對(duì)其進(jìn)行觀察，當(dāng)只有一小塊冰存在時(shí)，將其從水中取出。將細(xì)胞懸浮液吸入離心管中，搖勻后離心5分鐘，并去除上清液。而后在其中加入培養(yǎng)液并培養(yǎng)，24小時(shí)后換一次培養(yǎng)液即可;

　　總的來說，細(xì)胞保存的過程并沒有多么復(fù)雜，但是在凍存和解凍的過程中有很多細(xì)節(jié)問題需要引起注意。而且關(guān)于細(xì)胞凍存的溫度需要特別注意，否則很容易造成細(xì)胞的損壞。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供細(xì)胞培養(yǎng)凍存等服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。