寫在前面
近年來抗體在檢測、診斷、治療等方面發(fā)揮了越來越重要的作用。兔單克隆抗體具有比鼠源抗體活性更好且靈敏度更高、比人源抗體更易獲得等優(yōu)點。構建免疫噬菌體展示抗體庫是目前獲得兔源單克隆抗體庫比較常用的方法。

兔抗體庫以多克隆抗體(polyclonal antibody, pAbs)的形式被廣泛應用于免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)、蛋白質印跡法(Western blot)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和流式細胞術等免疫學研究領域，是獲得高親和力和特異性抗體的重要來源。人類和小鼠在VH-D-JH(重鏈)和VL-JL(輕鏈)基因重排后幾乎完全依賴體細胞超突變來進一步多樣化抗體基因，而兔的V-(D)- J重組之后是體細胞基因轉換和體細胞超突變，以擴展一組和二組抗體庫。此外，家兔(Oryctolagus cuuniculus)屬于兔形目(Lagomorpha)，與嚙齒類(Rodentia)的分類學目小鼠、大鼠等嚙齒類動物在進化上距離較遠。眾所周知，抗原的來源與免疫動物之間種系關系越遠，其抗原免疫原性越強，越易產(chǎn)生免疫應答；反之，種系關系越近，則抗原免疫原性越弱。因此，由于免疫耐受，鼠和人單克隆抗體(mAbs)無法識別的鼠和人抗原之間保守的表位往往可以被兔單克隆抗體(mAbs)識別。然而，大規(guī)模使用多克隆抗體的可行性受到一些因素的限制，例如在工業(yè)上穩(wěn)定地復制的挑戰(zhàn)。通過噬菌體展示或雜交瘤技術產(chǎn)生兔單克隆抗體的能力克服了這一限制。

噬菌體展示技術產(chǎn)生的兔單克隆抗體具有表型和基因型同時被選擇的優(yōu)點。對兔單克隆抗體(mAb)序列的分析使我們能夠制備多種格式的單克隆抗體(mAb)，包括scFv, Fab, scFv- fc和IgG，更重要的是，可以進行人源化和親和成熟。因此，通過噬菌體展示技術制備的兔單抗已成為一種有前景的人類診斷和治療試劑。研究人員利用遺傳多樣性的naïve家兔骨髓和脾臟的逆轉錄mRNA和一組用于PCR擴增輕鏈和重鏈的寡核苷酸，建立了包含> 100億家兔單抗的噬菌體展示文庫，并通過二代測序(NGS)進行驗證。

利用噬菌體展示技術，普健生物提供構建噬菌體展示抗體文庫、噬菌體展示多肽文庫、抗原表位篩選、抗體親和力成熟等技術服務。同時普健生物具有鼠源天然抗體文庫、兔源天然抗體文庫、納米抗體天然抗體文庫、重組全人源噬菌體抗體文庫等。

服務優(yōu)勢
1. 豐富的噬菌體抗體技術經(jīng)驗，五年以上噬菌體抗體開發(fā)，交付上百個噬菌體展示抗體開發(fā)項目
2. 具有全人源重組抗體庫，庫容高達千億級別（10¹¹ pfu)，兩步建庫法，保證了文庫的多樣性，抗體庫片段插入
正確率高；可以兩周拿到全人源重組抗體
3. 可以構建多物種（人源、小鼠、兔子、羊駝等）抗體文庫
4. 可以構建多種類型（scfv、Fab、VHH 等）的抗體文庫


參考文獻
Haiyong Peng,Mining Naïve Rabbit Antibody Repertoires by Phage Display for Monoclonal Antibodies of Therapeutic Utility,Journal of Molecular Biology,Volume 429, Issue 19, 15 September 2017, Pages 2954-2973