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利用病原學技術(shù)快速鑒定非洲豬瘟病毒

發(fā)表時間:2024-01-02 訪問次數(shù):395


非洲豬瘟(Africanswinefever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染豬而引起的一種急性、烈性傳染病,死亡率可達100%已被世界動物衛(wèi)生組織(WorldOrganizationforAnimalHealth,WOAH)列為法定報告動物疫病。目前尚無有效藥物和疫苗用于治療和預防ASF,主要通過臨床診斷和撲殺感染動物來控制疫情傳播。建立快速、精準和高效的診斷方法對于疫病防控至關(guān)重要。當前,國內(nèi)外ASF相關(guān)診斷技術(shù)主要包括傳統(tǒng)病原學診斷技術(shù)、新型病原學診斷技術(shù)以及血清學診斷技術(shù)等。

傳統(tǒng)病原學診斷技術(shù)
利用病原學診斷技術(shù)能夠在ASF疫情早期檢測出動物體內(nèi)是否攜帶病毒。傳統(tǒng)病原學診斷技術(shù)主要包括病毒分離實驗和紅細胞吸附實驗(haemadsorption,HAD)。與血清學檢測方法相比,病原學檢測結(jié)果可以直接判斷是否感染病毒。此外,病毒核酸檢測包括聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction,PCR)和實時熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)等方法,具有靈敏度高的特點。傳統(tǒng)病原學診斷技術(shù)在ASF的早期診斷和流行病學調(diào)查中發(fā)揮了重要作用,可降低病毒傳播風險,從而預防ASF的大規(guī)模傳播流行,減少ASF暴發(fā)導致的經(jīng)濟損失。

新型病原學診斷技術(shù)
隨著對ASFV的深入研究和分子生物學技術(shù)的發(fā)展,一系列新型核酸診斷技術(shù)逐漸被開發(fā),如微滴數(shù)字PCR(dropletdigitalpolymerasechainreaction,ddPCR)檢測技術(shù)、LAMP技術(shù)、重組酶聚合酶擴增(recombinasepolymeraseamplification,RPA)技術(shù)和以CRISPR/Cas(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedproteinssystem)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù)等,這些新型診斷技術(shù)為ASF的精確診斷和有效防控提供了更加全面的支持。

血清學診斷技術(shù)
血清學診斷是基于抗原抗體反應來診斷和監(jiān)測是否存在病毒感染。WOAH推薦的ASF血清學檢測方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)、間接免疫熒光實驗(indirectimmunofluorescenceassay,IFA)、間接免疫過氧化物酶實驗(indirectimmunoperoxidasetest,IPT)及免疫層析實驗等。血清學檢測可以用于豬群疫病狀態(tài)的定期監(jiān)測,能夠發(fā)現(xiàn)病毒的慢性感染,有利于控制潛在疫情的發(fā)生和擴散。

目前,ASF檢測技術(shù)主要包括病原學與血清學檢測方法,每種方法各有其優(yōu)缺點。在ASF病原學檢測方面,PCRqPCR檢測靈敏性高,但其檢測結(jié)果易出現(xiàn)假陽性;LAMPRPA等無需專業(yè)設(shè)備,但對人員和工作環(huán)境要求高,易造成氣溶膠污染ddPCR具有高敏性和特異性,但昂貴的實驗設(shè)備限制了其臨床應用;利用CRISPR/Cas系統(tǒng)進行檢測的技術(shù)仍然處于初步研發(fā)階段尚未有商品化的產(chǎn)品。近期流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)了較低毒力的ASFV毒株,能夠引起慢性或持續(xù)性感染臨床檢測可能會出現(xiàn)病毒核酸檢測陰性但抗體檢測陽性的情況,ASF病原學診斷帶來了很大的挑戰(zhàn)。

參考文獻
ZHANG Yuan-yuan, JIN Jia-xin, ZHAO Xu-yang, ZHANG Shuai, LIU Yue-yue, LI Xiang-lin, SUN Ai-jun, LIN Shu-qian, ZHUANG Guo-qing. Research Progress of Novel Diagnostic Methods of African Swine Fever. Journal of Chinese Biotechnology, 2023, 43(10): 62-71 doi:10.13523/j.cb.2305012

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