重組蛋白表達在現(xiàn)代生命科學研究中起著重要的作用,能夠為我們在表達量以及表達質量上帶來非常大的幫助。通常情況下,重組蛋白是通過將外源基因導入到宿主細胞內,隨著細胞蛋白的表達而表達。目前,重組蛋白表達主要通過五大表達系統(tǒng)來實現(xiàn)表達和純化。
什么是重組蛋白表達?
重組蛋白表達是利用DNA重組技術,將目標基因導入到宿主細胞中,通過宿主的生物機制表達出所需蛋白。通過基因克隆,將基因擴增后形成重組質粒,將質粒導入到宿主細胞中(使用化學方法、電穿孔或者嗜熱菌等方法進行轉染),而后將細胞進行目的蛋白表達;
重組蛋白表達有哪幾種類型呢?
1、融合表達
通過將目的蛋白基因序列構建到表達載體中,由相同的調控原件進行融合表達;
2、非融合表達
這個方法與融合表達相對,所得目的蛋白不與任何蛋白標簽進行融合表達,不過這個方法會因為宿主中的蛋白酶而降解,從而失去活性;
3、胞內表達
就重組蛋白表達而言,大多數(shù)的目的蛋白都以胞內表達實現(xiàn),當然了,有些時候,在胞內表達時,會因為細胞內部的原因導致蛋白結構發(fā)生影響。這個時候,我們就需要借助分泌信號肽等蛋白標簽來實現(xiàn)表達;
4、分泌表達
所謂的分泌表達也就是我們常說的胞外表達,這種表達方式更適合于蛋白的純化,也比較穩(wěn)定不易降解;
當然了,就溶解性而言,重組蛋白表達也可以分為可溶性表達和非可溶性表達,也就是我們常說的是否會形成包涵體。雖然說現(xiàn)階段的重組蛋白表達技術存在著一定的不足之處,但是,其所能帶來的好處是不言而喻的。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。