哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)是現(xiàn)階段蛋白表達(dá)的常用方式之一,因?yàn)槠涞鞍缀吞烊坏鞍赘鼮橄嘟?,而且更容易正確折疊,可以準(zhǔn)確地進(jìn)行糖基化和乙酰化等修飾。根據(jù)蛋白表達(dá)的差異,可以將哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)分為瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)、穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)以及誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)。今天,普健生物在這里和大家具體聊聊有關(guān)哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)的一些常見(jiàn)表達(dá)方式。
一、瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)
瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)指的是宿主細(xì)胞在導(dǎo)入表達(dá)載體后,不進(jìn)行相關(guān)選擇培養(yǎng),讓載體DNA隨著細(xì)胞分裂而逐漸丟失,使得目的蛋白能夠獲得短暫地表達(dá);
瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于表達(dá)周期短、表達(dá)量高,但是對(duì)于相關(guān)技術(shù)要求高,需要控制好質(zhì)粒純度以及轉(zhuǎn)染效率;
二、穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)
和瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)不同,穩(wěn)定表達(dá)需要在載體進(jìn)入細(xì)胞后進(jìn)行選擇培養(yǎng),使得載體DNA能夠穩(wěn)定存在細(xì)胞內(nèi),使得目的蛋白能夠獲得穩(wěn)定且持久地表達(dá);
穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于其能夠?qū)崿F(xiàn)目的蛋白穩(wěn)定持久地表達(dá),但是需要進(jìn)行增壓擴(kuò)增等操作,想要穩(wěn)定表達(dá)相對(duì)費(fèi)時(shí)費(fèi)力一些;
三、誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)
和如上兩種表達(dá)方式不同,誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)需要將目的基因進(jìn)行外源小分子誘導(dǎo)后再進(jìn)行表達(dá),采用異源啟動(dòng)子、增強(qiáng)子以及可擴(kuò)增的遺傳標(biāo)記,可有效提升蛋白表達(dá)量;
誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于選擇的誘導(dǎo)調(diào)控因子不會(huì)和細(xì)胞內(nèi)的因子產(chǎn)生相互作用,而且其不會(huì)收到細(xì)胞內(nèi)部環(huán)境改變而受到影響,具備很好的嚴(yán)謹(jǐn)性和特異性;
總的來(lái)說(shuō),這三種表達(dá)方式各自具備著不同的優(yōu)勢(shì)和不足,需要結(jié)合抗體制備的相關(guān)需求以及技術(shù)支持等綜合選擇。而且因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞表達(dá)所得的蛋白更相似天然蛋白,內(nèi)毒素也更少,所得蛋白的穩(wěn)定性更好。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。