單B細胞技術(shù)作為新一代的抗體開發(fā)技術(shù),是繼雜交瘤技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)后的又一抗體表達方式。通過單B細胞技術(shù)可以為我們制備具有高特異性、高活性以及高親和力的抗體,是生物醫(yī)學研究、診斷以及抗體藥物開發(fā)的重要手段。下面,普健生物和大家具體聊聊單B細胞的相關(guān)技術(shù)。
什么是單B細胞技術(shù)?
單B細胞技術(shù)的原理相對簡單,通過將免疫后的一個B細胞提取出來,而后通過抗體基因擴增的方式來獲得單克隆抗體。
單B細胞的制備流程:
1、動物免疫。選擇兔子作為實驗動物,通過抗原注射的方式來刺激免疫反應,一般在免疫4-5次后,使得其發(fā)生免疫反應;
2、單個B細胞分離。通過PBMC流式分選方法從中分選出具備相關(guān)特異性的單個B細胞;
3、單B細胞培養(yǎng)。對B細胞進行分選及培養(yǎng),然后將培養(yǎng)的上清液進行前期介導檢測;
4、基因測序。通過對抗體基因可變區(qū)進行測序;
5、載體構(gòu)建及表達。進行抗體的哺乳表達載體構(gòu)建,并進行相應的表達及蛋白純化工作;
單B細胞制備的優(yōu)勢:
單B細胞技術(shù)制備的抗體為天然抗體,所得抗體具備更高的親和力、特異性強、可成藥性高,僅需16-20周的時間即可完成抗體表達服務;
相比傳統(tǒng)抗體制備方式來說,單B細胞技術(shù)不僅在特異性上更高,更是具備更強的親和力。而且通過單B細胞能夠快速地制備抗體,具備高通量、高效率、高特異性的優(yōu)點,在抗體制備上有著極大的優(yōu)勢。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體制備服務,如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。