兔單克隆抗體制備是現(xiàn)階段抗體制備的常用方式,因為相比鼠單克隆抗體來說,兔單抗能夠制備結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜的抗體,而且抗體種類也更多。只是,在制備兔單克隆抗體的過程中,常常會遇到很多問題,都可能會導(dǎo)致抗體制備失敗的情況。有鑒于此,普健生物在這里和大家具體聊聊相關(guān)問題以及相應(yīng)的解決方法。
1、特異性不足
如果抗體與非目標(biāo)蛋白發(fā)生結(jié)合時,就預(yù)示著抗體的特異性不足。這個時候,我們需要重新對抗原進行評估,通過整免疫方案以及優(yōu)化抗原的純度與質(zhì)量來提升所得抗體的特異性;
2、抗體產(chǎn)量低
抗體產(chǎn)量達不到預(yù)期時,可以考慮通過調(diào)整免疫方案、增加免疫次數(shù)以及加強免疫佐劑的方式來提升產(chǎn)量;
3、抗體親和力低
抗所得抗體親和力低時,可以通過調(diào)整免疫方案,重新選擇抗原以及純化等方式來提升親和力;
4、記憶B細胞可以制備抗體嗎?
可以,但是需要將記憶B細胞分化成終端漿細胞來分泌抗體;
5、單B細胞和漿細胞哪個更具優(yōu)勢?
可以說各具優(yōu)勢,記憶B細胞拷貝數(shù)偏低,而漿細胞的含量較少,需要結(jié)合實際情況來進行選擇;
6、流式細胞術(shù)可以分選多少個B細胞?
就目前來說,流式細胞術(shù)能夠分選10板具備相關(guān)特異性的單B細胞;
當(dāng)然了,兔單克隆抗體制備過程中會遇到各種各樣的問題,遠不止我們?nèi)缟纤f的六種。但是,其中大部分的問題都是因為實驗操作過程中的誤操作所導(dǎo)致,這個時候可以回顧一下實驗過程,來解決相關(guān)問題。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供兔單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。