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什么是單克隆抗體?它的制備流程是什么?

發(fā)表時間:2022-08-10 訪問次數(shù):1112

  單克隆抗體是由B細胞通過克隆所產(chǎn)生的具備高度均一且僅針對某種特定抗原表位所產(chǎn)生的抗體。一般來說,我們都會采用雜交瘤技術(shù)來對其進行制備,同時結(jié)合細胞融合技術(shù),將具備該類分泌特異性抗體能力的B細胞進行繁殖,產(chǎn)生B細胞雜交瘤。那么,單克隆抗體產(chǎn)生的基本原理是什么呢?

  我們知道,人體內(nèi)只有骨髓細胞是可以在體外實現(xiàn)生長繁殖的,所以,我們一般用骨髓細胞來進行其與淋巴細胞的結(jié)合,得到一種骨髓瘤細胞。這種雜交出來的細胞會繼承兩種親代細胞的特性,既具備淋巴細胞合成專一抗體的能力,又具備體外無限增殖的能力,所以,其非常適合用來培養(yǎng)細胞群,進一步為我們提供特異性單克隆抗體。

  那么,單克隆抗體的具體制備流程有哪些呢?

  一般來說,單克隆抗體制備的流程相對規(guī)范化,雖然一些公司有著各自不同的制備流程,但是大體來說,一般也遵循如下的順序:免疫動物、細胞融合、選擇性培養(yǎng)、篩選及純化、大規(guī)模生產(chǎn)。

  免疫動物。一般我們采用目的抗原去免疫小鼠,通過注射預定的抗原,刺激相應的B淋巴細胞克隆、增殖,最終形成B淋巴細胞;

  細胞融合。取出小鼠脾臟并將其研磨,制備細胞懸浮液。然后將同系骨髓瘤細胞與細胞懸浮液按照一定比例混合,促使其融合;

  選擇性培養(yǎng)。其實就是雜交瘤細胞的篩選;

  篩選及純化。采用靈敏、快速、特異的免疫學方法,篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞,然后對其進行克隆擴增。之后測量其免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量后,之后在進行凍存。

  大規(guī)模生產(chǎn)。搭建合適的生產(chǎn)環(huán)境,使得其可以大批量地生產(chǎn)特異性的單克隆抗體;

  雖然說現(xiàn)在不同的廠家都有著不同的單克隆抗體制備方式,但是,總體來說,一般都遵循如上幾種方式,產(chǎn)生的抗體特異性強,純度高,能夠在一定長度上滿足我們的需求。當然了,因為人體的異源性,使得其無法達到我們的使用要求,之后,我們會和大家繼續(xù)介紹一種可以提高其使用效率的方式“抗體人源化”。普健生物為廣大用戶提供專業(yè)的單克隆抗體制備服務,如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。