好吧,我承認,最近我又犯了一個錯,本來打算短暫放在4度環(huán)境下的一個抗體被放了2個星期,最終導致抗體失去了大部分活性,造成了后期實驗結構沒達標。所以,對于抗體的保存來說,是非常重要的。如果保存得當,大部分的抗體都能保存數(shù)月甚至數(shù)年。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關抗體保存的相關問題。
1、保存溫度
對于大部分的抗體來說,保存在-20度和-80度下為最佳保存條件。當然了,通過分裝后再保存能夠在最大程度上減少對抗體造成的損耗,而且能夠避免引入污染的情況。當然了,有的抗體在分裝后,需要保存在4度的環(huán)境下;
2、溫度特例
對于偶聯(lián)抗體來說,需要保存在4度的環(huán)境下,如果在-20或-80度的環(huán)境下,可能會影響到其結合力,當然了,還會造成蛋白酶活性的降低;
3、污染
對于制備好的抗體來說,我們需要做好微生物污染預防,需要將疊氮化鈉加入其中。當然了,我們需要注意好疊氮化鈉的濃度,盡量控制在0.02%(w/v)。當然了,這只是一部分,還有一些其他緩沖液需要加入到其中,我們需要結合實際情況來進行選擇;
4、染色處理特例
當然了,在需要對細胞進行染色處理的時候,就不能對其進行疊氮化鈉處理,否則會造成細胞色素電子傳遞系統(tǒng)。也就是說,具體情況我們需要結合具體的情況來進行處理;
5、蛋白濃度
在實驗時,我們需要將蛋白稀釋到工作濃度,4度環(huán)境下保存不要超過1天,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用,不要放置太長時間。當然了,蛋白的量我們需要多放一些,需要考慮到結合到容器壁上的損失。同時,不要在偶聯(lián)抗體中加入蛋白穩(wěn)定劑,因為穩(wěn)定劑會造成抗體效率降低的情況;
當然了,抗體的保存一定要選擇合適的溫度,如果選擇的溫度過低,會造成抗體失活。而且不要進行反復凍融,以為你反復凍融可能會造成抗體形成聚集體,結合力會出現(xiàn)一定程度的降低。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體定制和制備服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。