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抗體人源化-常用的人源化過程是怎么樣的?

發(fā)表時間:2023-06-30 訪問次數(shù):725

  在利用小鼠等動物制備抗體時,因為其異源性的影響,治療效果往往達不到我們的預(yù)期,甚至反過來會對機體造成一些不好的影響。因此,我們需要通過對抗體進行一定的改造,讓它更符合我的需求,這個過程我們稱之為“抗體人源化”。

抗體人源化-常用的人源化過程是怎么樣的?

  之前我們和大家具體聊過抗體人源化的一些定義及其優(yōu)勢,今天我們就和大家復(fù)習一下,然后具體聊聊抗體人源化的操作過程。

  相比傳統(tǒng)抗體來說,抗體人源化改造后具備哪些好處呢?

  1、抗體人源化可以減少免疫反應(yīng)。人源化后的抗體與人類自身的抗體更相似,使用這些抗體治療疾病時,患者可能更少出現(xiàn)免疫反應(yīng)或過敏反應(yīng);

  2、可以提高治療的效果。人源化的抗體可以更好地與人體的免疫系統(tǒng)相互作用,從而增強治療效果。它們能夠更有效地結(jié)合目標分子,并激活免疫反應(yīng),從而更有效地中和病原體、抑制疾病進程或調(diào)節(jié)免疫反應(yīng);

  3、一定程度上增強抗體的穩(wěn)定性。人源化的抗體通常具有更長的半衰期,這意味著它們可以在體內(nèi)停留更長時間,從而減少治療頻率和劑量;

  4、改善生產(chǎn)效率并提升抗體的一致性。源化的抗體可以通過基因工程技術(shù)進行大規(guī)模生產(chǎn),確保每批產(chǎn)品的質(zhì)量和一致性;

  那么,抗體人源化的具體操作過程是怎樣的?

  1. 目標選擇:首先確定需要人源化的目標抗體。這可以是已知的具有治療潛力的動物源性抗體,例如小鼠單克隆抗體。

  2. 基因克?。簭膭游镏蝎@取抗體的基因,通常是通過提取抗體產(chǎn)生細胞(例如淋巴細胞)的mRNA,并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。然后使用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增抗體的可變區(qū)(variable region)和常量區(qū)(constant region)的基因。

  3. 基因重組:將人源化的基因與人類免疫球蛋白基因的相應(yīng)區(qū)域進行重組,生成人源化的抗體基因。這通常涉及將抗體的可變區(qū)域與人類免疫球蛋白基因的常量區(qū)域連接起來。

  4. 表達和制備:將人源化的抗體基因?qū)氡磉_宿主細胞,如哺乳動物細胞或細菌表達系統(tǒng)中,使其產(chǎn)生人源化抗體。這些抗體可以通過細胞培養(yǎng)和純化步驟進行大規(guī)模制備。

  5. 功能驗證:對獲得的人源化抗體進行功能驗證,確保其與原始抗體具有相似的結(jié)構(gòu)和功能。這可能包括體外結(jié)合實驗、細胞功能分析、動物模型的療效評估等。

  6. 優(yōu)化和改良:根據(jù)需要,對人源化抗體進行優(yōu)化和改良,以提高其親和力、穩(wěn)定性和治療效果。這可能包括進一步工程化的修改,如點突變或親和力成熟。

  當然了,這也只是一般的抗體人源化操作流程,而且不同的公司,因為技術(shù)、人員以及目的等方面的需求不同,操作方式上會有著一定的差異??偟膩碚f,抗體人源化是一個復(fù)雜的過程,需要結(jié)合基因工程等技術(shù)來實現(xiàn)。普健生物擁有10余年抗體制備經(jīng)驗,專業(yè)為您體用抗體人源化改造服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。