在兔單克隆抗體制備的過程中,常常會因為這樣或那樣的原因?qū)е聦嶒灥氖?,很多時候是一些細(xì)節(jié)操作方面的問題導(dǎo)致,其他則是因為實驗設(shè)計方面的問題。有鑒于此,普健生物在這里和大家盤點有關(guān)兔單克隆抗體制備過程中的一些常見問題及其解決辦法。
1、抗體產(chǎn)量低
這也是抗體制備中最常見的一個問題,導(dǎo)致這個現(xiàn)象的原因也很多??梢酝ㄟ^提高抗原免疫方案、增加免疫次數(shù)或者通過使用強化佐劑的方式來提升其免疫反應(yīng);
2、抗體特異性不足
所得抗體的特異結(jié)合性較差,會和非目標(biāo)蛋白相結(jié)合。當(dāng)碰到這種情況時,我們可以選擇重新選擇抗原,優(yōu)化抗原純度;
3、抗體親和力不足
一般來說,出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是因為兔單抗的親和力不足導(dǎo)致??梢酝ㄟ^調(diào)整免疫方案、優(yōu)化抗原選擇以及優(yōu)化純化步驟等方式來提升抗體親和力;
4、雜交瘤細(xì)胞融合率低
可能是因為溫度、環(huán)境等融合條件選擇不合適。我們可以通過優(yōu)化融合條件,結(jié)合細(xì)胞的特性,設(shè)置合適的融合環(huán)境,或者嘗試其他融合方法;
5、抗體穩(wěn)定性差
主要是因為單克隆細(xì)胞缺乏穩(wěn)定性,從而導(dǎo)致抗體產(chǎn)量不穩(wěn)定。我們可以通過不定期測試細(xì)胞穩(wěn)定性來提升所得抗體的穩(wěn)定性,也可以通過選擇更加穩(wěn)定的單克隆抗體細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增來提升抗體的穩(wěn)定性;
6、抗體受到污染
主要原因是因為細(xì)胞或抗原受到污染??梢酝ㄟ^適當(dāng)?shù)靥嵘兌葋斫鉀Q;
當(dāng)然了,在實驗過程中,我們需要做好相應(yīng)的實驗記錄,并記錄好詳細(xì)的實驗步驟,以便于后期進(jìn)行相關(guān)查詢。在兔單克隆抗體制備的過程中,我們需要注意好相關(guān)細(xì)節(jié)問題,做好相應(yīng)的優(yōu)化和調(diào)整策略,這樣,才能更好地保證抗體的制備。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供兔單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。