自從雜交瘤細胞技術(shù)被建立以來,這種既能分泌抗體,又能無限增殖的雜交融合細胞技術(shù)就得到了廣泛的使用。它能大量產(chǎn)生同一種抗體,而且是針對同一抗原的高度同質(zhì)化的抗體,這種抗體我們稱之為單克隆抗體(單抗,monoclonal antibody)。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)鼠單克隆抗體制備的詳細過程。
基本過程如下:
1、將抗原注入小鼠體內(nèi);
2、培養(yǎng)小鼠一定時間;
3、獲取小鼠脾臟,獲得脾細胞;
4、通過雜交瘤技術(shù),將其B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,獲得雜交瘤細胞(不僅具備B細胞特性,同時可以無限增殖);
5、篩選出優(yōu)質(zhì)的雜交瘤細胞;
6、對篩選出來的雜交瘤細胞進行鑒定和克隆(也就是我們常說的雜交瘤細胞株);
目前雜交瘤技術(shù)的使用變得越發(fā)的廣泛,還有更多的潛力等待我們開發(fā)。相對于抗血清來說,能減少大量動物和費用。而且其純度高,均一性好,更適合藥物生產(chǎn)和臨床使用。
獲得雜交瘤細胞株后,我們通常會通過如下兩個方法來產(chǎn)生單克隆抗體。
1、小鼠腹水。將雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔內(nèi),在獲得腹水的同時,可以通過純化獲得抗體。這個方法操作相對簡單,花費較少,重復性高,但是傷害動物,如果需要實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),則需要使用到大量的小鼠;
2、細胞培養(yǎng)。直接培養(yǎng)雜交瘤,提取其上清液中的抗體。這個方法適合大規(guī)模生產(chǎn),只是獲得的抗體所包含的雜質(zhì)較多,可能會產(chǎn)生一些影響到當體純度的雜蛋白;
如上,便是有關(guān)鼠單克隆抗體生產(chǎn)的全部過程,可以說,如上的方法都存在著一定的局限性,純度高的方法對動物傷害較大,大規(guī)模生產(chǎn)的方法則含雜質(zhì)較多。所以,我們在日常實驗中,需要結(jié)合自己的實際來選擇合適的方法,以滿足我們單克隆抗體生產(chǎn)的需求。更多鼠單抗生產(chǎn)的知識,敬請關(guān)注普健生物。