在接觸抗體制備時(shí),我們常常會(huì)聽到各式各樣的名詞,其中,雜交瘤細(xì)胞這個(gè)詞的出現(xiàn)頻率可以說是非常高的。為什么呢?因?yàn)槲覀兊目贵w制備方式中,最常用的就是雜交瘤細(xì)胞技術(shù)。那么,什么是雜交瘤細(xì)胞呢?這項(xiàng)技術(shù)的具體操作步驟又是怎樣的呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
什么是雜交瘤細(xì)胞技術(shù)?有關(guān)雜交瘤細(xì)胞技術(shù)我們?cè)谇懊婧痛蠹矣辛倪^,在“什么是雜交瘤技術(shù)?它的意義體現(xiàn)在哪些方面?”一文中,我們和大家具體聊過雜交瘤技術(shù)的定義以及其核心操作步驟,大家有興趣可以具體去了解一下。
而所謂的雜交瘤細(xì)胞技術(shù)就是將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,讓新產(chǎn)生的細(xì)胞既具備抗體制備的能力,又具備無限增殖的能力,從而能夠長期穩(wěn)定地為我們提供抗體產(chǎn)品的一項(xiàng)技術(shù)。
那么,雜交瘤細(xì)胞制備的具體步驟是怎樣的呢?
其實(shí)雜交瘤細(xì)胞的制備主要包含如下三個(gè)核心步驟:細(xì)胞融合、培養(yǎng)基選擇以及抗原特異性選擇。
1、細(xì)胞的選擇與融合
雜交瘤細(xì)胞制備的目的就是為了產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的單克隆抗體,所以,融合的細(xì)胞必須是經(jīng)過免疫后的B細(xì)胞,通常我們從脾臟中提取。產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞的最佳情況是最低程度損傷細(xì)胞,而且能夠高頻率融合的細(xì)胞;
2、培養(yǎng)基的選擇與應(yīng)用
細(xì)胞的融合存在著極大的隨機(jī)性,所以,產(chǎn)生的細(xì)胞常常會(huì)呈現(xiàn)出多種形式。比如脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞、未融合脾細(xì)胞、未融合瘤細(xì)胞及多細(xì)胞聚合體。通過培養(yǎng)基培養(yǎng)5-7天,細(xì)胞多聚體和未融合的細(xì)胞則會(huì)自動(dòng)篩除,而后,我們只需要將合格的細(xì)胞篩選出來即可;
3、抗原特異性選擇
一種抗原往往都會(huì)存在多個(gè)決定簇,而動(dòng)物免疫應(yīng)答后,目標(biāo)抗原的B細(xì)胞只占少數(shù),而融合又 是一個(gè)隨機(jī)過程,所以我們需要通過篩選去除。然后再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行克隆化,通過抗原包挑選出目標(biāo)細(xì)胞株,繁殖后再進(jìn)行培養(yǎng);
總的來說,雜交瘤細(xì)胞就是通過將B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的產(chǎn)物,這種“大”細(xì)胞能夠無限增殖,并且制備抗體,以達(dá)到抗體制備的需求。隨著技術(shù)的不斷改進(jìn),雜交瘤細(xì)胞的使用相對(duì)變得少了一些,但是,現(xiàn)階段的很多抗體依然采用這個(gè)方式制備,相信在未來的使用中也會(huì)非常的頻繁。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來單咨詢。