雜交瘤細(xì)胞制備抗體技術(shù)相信大家都不覺得陌生了，它就是一種將免疫后的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后產(chǎn)生單克隆抗體的傳統(tǒng)方法。如果想了解雜交瘤相關(guān)的具體知識，可以點(diǎn)擊“什么是雜交瘤測序?它的操作流程是怎樣的?”查看。今天，普健生物在這里簡單和大家介紹一下有關(guān)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時常見的一些問題。

　　一、微生物污染

　　1、細(xì)菌和真菌污染一般都是因為操作不當(dāng)所導(dǎo)致，除了實驗之前做好日常消殺外，還需要確保消毒劑的純度及質(zhì)量;

　　2、支原體污染則可能是因為血清制品以及相關(guān)實驗材料污染所導(dǎo)致，一般來說，短期污染沒什么明顯變化，但是時間長了之后可能會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢。所以，在購買相關(guān)產(chǎn)品的時候，要盡量保證相關(guān)產(chǎn)品的純度，減少不必要的麻煩;

　　3、原聲生物污染常見的主要為黑膠蟲，污染后會出現(xiàn)一些小黑點(diǎn);

　　二、細(xì)胞不生長

　　1、最常見的原因是因為融合試劑有毒，需要進(jìn)行替換;

　　2、使用的血清質(zhì)量很差，可以優(yōu)先考慮胎牛血清;

　　3、添加劑比例不正常;

　　三、細(xì)胞不分泌抗體

　　1、細(xì)胞直接不分泌抗體一般來說主要是因為抗原免疫性差所導(dǎo)致，脾臟損傷嚴(yán)重等;

　　2、后期分泌抗體越來越少主要因為骨髓瘤繁殖被抑制、克隆不及時以及染色體丟失等情況導(dǎo)致;

　　四、細(xì)胞克隆困難

　　1、對已有雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選;

　　2、在培養(yǎng)基中加入IL-6;

　　其實大家不難看出，導(dǎo)致雜交瘤細(xì)胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因為細(xì)節(jié)方面的錯誤操作導(dǎo)致。所以，我們在日?？贵w制備時，不僅要嚴(yán)格按照實驗流程來，而且需要注意各個細(xì)節(jié)方面的問題。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤制備單克隆抗體服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。