蛋白表達(dá)的重要性我們就不在這里一一贅述了，就我們所知的抗體其實(shí)也是蛋白之一，所以，做好蛋白就標(biāo)志著我們能否做好各種蛋白抗體產(chǎn)品。蛋白生產(chǎn)的過(guò)程其實(shí)不困難，其實(shí)就是將需要表達(dá)的片段添加到DNA中，成成nRNA，然后表達(dá)出需要的蛋白產(chǎn)品。說(shuō)起來(lái)簡(jiǎn)單，但是做起來(lái)非常的困難。下面，普健生物就和大家具體聊聊蛋白的表達(dá)過(guò)程。

　　蛋白的合成過(guò)程看起來(lái)并不困難，其實(shí)就是從DNA到mRNA，表達(dá)出來(lái)，就是蛋白了。

　　一般的操作流程如下：

　　1、克隆或合成目的基因

　　2、構(gòu)建載體

　　3、蛋白表達(dá)、純化及檢驗(yàn)

　　4、大量表達(dá)

　　表達(dá)系統(tǒng)操作的詳細(xì)步驟和所需時(shí)間：

　　1、基因合成及密碼子優(yōu)化(一般需要耗時(shí)1-2周);

　　2、載體構(gòu)建。我們需要將目標(biāo)DNA克隆至表達(dá)載體上，然后對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序合格后，再進(jìn)行大量質(zhì)粒的制備(一般這個(gè)過(guò)程需要持續(xù)1-2周);

　　3、瞬時(shí)表達(dá)評(píng)估。主要進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)及表達(dá)水平檢測(cè)(通常需要耗時(shí)2周);

　　4、穩(wěn)定細(xì)胞株開發(fā)。主要進(jìn)行細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及篩選，MTX擴(kuò)增及篩選，細(xì)胞建庫(kù)等工作(一般來(lái)說(shuō)需要耗時(shí)12-20周);

　　5、大量表達(dá)。在如上的過(guò)程正常實(shí)現(xiàn)后，將細(xì)胞投入大量生產(chǎn)，并對(duì)其進(jìn)行純化工作(一般耗時(shí)2-3周);

　　總的說(shuō)來(lái)，蛋白表達(dá)的過(guò)程其實(shí)并不顯得特別的困難，相比單克隆抗體的制備過(guò)程來(lái)說(shuō)，也不那么繁瑣，但是，如果不注意相應(yīng)的細(xì)節(jié)問(wèn)題，依然容易出現(xiàn)失敗的情況。所以，在日常制備單邊的過(guò)程中，我們需要注意到一些細(xì)節(jié)方面的問(wèn)題。普健生物為您提供專業(yè)的蛋白制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。