單克隆抗體是治療抗體中使用最為廣泛、療效最好的一種,目前已經(jīng)有大批抗體藥物獲批生產(chǎn)。最早一批的治療性抗體為小鼠雜交瘤抗體,單因?yàn)槠洚愒葱裕沟每贵w人源化技術(shù)不斷發(fā)展,最終發(fā)展成全人源抗體,而噬菌體展示技術(shù)則是抗體人源化的主要手段之一,因?yàn)橥ㄟ^(guò)其可以生產(chǎn)全人源抗體。
如何通過(guò)噬菌體展示技術(shù)實(shí)現(xiàn)抗體全人源化?
首先,我們需要分離免疫或未免疫的B細(xì)胞,擴(kuò)增抗體中的VH、VL基因片段;然后,將體外擴(kuò)增的基因片段翟茹相應(yīng)的載體;而后,在將抗體基因組合文庫(kù)插入到噬菌體編碼的膜蛋白基因中,使得其能夠隨著噬菌體的外殼蛋白表達(dá)而表達(dá),同時(shí)不會(huì)對(duì)其造成影響;通過(guò)與親和力較高的蛋白結(jié)合,通過(guò)富集、洗脫、擴(kuò)增等一系列的手段,重復(fù)3-5輪,得到所需噬菌體文庫(kù);
采用噬菌體文庫(kù)實(shí)現(xiàn)抗體人源化的優(yōu)缺點(diǎn)有哪些?
噬菌體展示技術(shù)可以節(jié)省傳統(tǒng)雜交瘤技術(shù)中所需的時(shí)間,直接跳過(guò)免疫和人源化改造的步驟,短期內(nèi)篩選到高親和力的全人源抗體序列;但是噬菌體展示技術(shù)對(duì)庫(kù)容的要求非常的高,而且還存在著一些未知或不可調(diào)控的因素,都會(huì)影響到建庫(kù)的質(zhì)量。一旦建庫(kù)質(zhì)量不達(dá)標(biāo),生產(chǎn)出的蛋白產(chǎn)品就無(wú)法達(dá)到我們的使用要求。
就目前來(lái)說(shuō),噬菌體展示技術(shù)能夠帶來(lái)的好處是毋庸置疑的,用這項(xiàng)技術(shù)生產(chǎn)出來(lái)的藥物獲批治療的越來(lái)越多。而且噬菌體抗體庫(kù)作為基因組時(shí)代的一個(gè)強(qiáng)有力的實(shí)驗(yàn)技術(shù),具備高效、經(jīng)濟(jì)、便捷等優(yōu)勢(shì),雖然說(shuō)在親和力、庫(kù)容量以及多樣性方面還有待提升,但是,相信隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,這些問(wèn)題將得到有效的解決。武漢普健生物作為一家擁有15年蛋白抗體制備經(jīng)驗(yàn)的企業(yè),擁有優(yōu)秀的噬菌體文庫(kù)構(gòu)建技術(shù),為您解決蛋白抗體制備方面的難題。