在進行重組蛋白表達(dá)的時候,我們常常會從多種表達(dá)方式中選擇一種最適合自己的,不僅能更好地實現(xiàn)表達(dá),而且相應(yīng)的成本投入也會低很多。那么,有關(guān)蛋白表達(dá)的這些方法您又了解多少呢?今天,普健生物就在這里和大家具體聊聊。
一、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)
在各類表達(dá)系統(tǒng)中,大腸桿菌是最早用來進行蛋白表達(dá)的物種,也是目前大家最為熟悉的一種。因為大腸桿菌表達(dá)量高,生產(chǎn)速度快,生產(chǎn)成本低,所以使用也最為廣泛;
優(yōu)點;表達(dá)水平高、成本低;
缺點:表達(dá)出的蛋白折疊性較差,易形成包涵體;
二、酵母表達(dá)系統(tǒng)
酵母表達(dá)也是目前較為常用的抗體表達(dá)方式之一,它在抗體表達(dá)的過程中不會產(chǎn)生毒素,但是高密度培養(yǎng)的時候表達(dá)量會很低,所以,釀酒酵母一般不用來大規(guī)模表達(dá)蛋白。而畢赤酵母則不存在這方面的問題,且翻譯后修飾表達(dá)出來的蛋白更加接近哺乳動物。
優(yōu)點:表達(dá)水平高,易于培養(yǎng),蛋白分泌高且無內(nèi)毒;
缺點:使用的誘導(dǎo)劑存在一定的危害,且糖基化不同于哺乳動物;
三、昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)
昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是目前國內(nèi)非常推崇的一種原核表達(dá)系統(tǒng),就是利用桿狀病毒結(jié)構(gòu)中的啟動子構(gòu)建表達(dá)載體,能有效提升真核表達(dá)中的效率;
優(yōu)點:表達(dá)水平高、生長速度快、有效的蛋白折疊;
缺點:需要使用的培養(yǎng)基費用高,而且需要使用到大量的病毒;
四、哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)
哺乳動物表達(dá)外源蛋白可利用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和病毒載體轉(zhuǎn)染,其在起始信號、加工、分泌、糖基化等方面有著極大的優(yōu)勢;
優(yōu)點:表達(dá)水平高、可大規(guī)模生產(chǎn)、有效折疊、無內(nèi)毒;
缺點:培養(yǎng)基昂貴,投入成本高,生產(chǎn)條件復(fù)雜,培養(yǎng)周期長;
總的來說,各個表達(dá)系統(tǒng)各具優(yōu)勢,也各有不足之處,適合不同需求下的不同生產(chǎn)條件。所以,我們在選擇蛋白表達(dá)系統(tǒng)的時候,需要結(jié)合自己的需求來進行選擇,這樣才能在更大程度提升表達(dá)的成功率以及降低相關(guān)成本。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。