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盤(pán)點(diǎn)穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建中的幾個(gè)重要步驟

發(fā)表時(shí)間:2022-12-07 訪問(wèn)次數(shù):773

  在生物藥品制備的過(guò)程中,涉及到很多方法,而且隨著技術(shù)的不斷更新,各種更優(yōu)質(zhì)的方法不斷出現(xiàn),而穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建則是抗體制備中的佼佼者。細(xì)胞株開(kāi)發(fā)的過(guò)程和早期生物藥開(kāi)發(fā)的方式不同,它的生產(chǎn)步驟主要為:宿主細(xì)胞選擇、表達(dá)載體、穩(wěn)定性檢測(cè),最后挑選表現(xiàn)最高的單克隆細(xì)胞株。對(duì)于不同的企業(yè)來(lái)說(shuō),這個(gè)過(guò)程是各不相同的,但是,其中有幾個(gè)尤為重要的步驟需要引起我們的注意。

  1、制定流程及細(xì)胞系選擇

  其實(shí)就是制定好詳細(xì)的制備流程,同時(shí)選擇合適的細(xì)胞系制備方式,選擇合適的細(xì)胞,做好相應(yīng)的準(zhǔn)備工作,這樣才能在更大程度上保證實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。我們知道,現(xiàn)階段的抗體藥物都喜歡利用CHO細(xì)胞,也是重組抗體藥物制備的細(xì)胞系。另外CHO培養(yǎng)過(guò)程中可以選擇改良的哺乳動(dòng)物細(xì)胞宿主,用于優(yōu)化其制備過(guò)程;

  2、啟動(dòng)子的合成

  蛋白表達(dá)的實(shí)質(zhì)其實(shí)就是一段DNA的表達(dá),而所謂的啟動(dòng)子其實(shí)就是開(kāi)啟蛋白表達(dá)的標(biāo)志。而通過(guò)優(yōu)化并合成的啟動(dòng)子能夠提供更多轉(zhuǎn)錄控制,促進(jìn)生物制藥的研發(fā);

  3、自動(dòng)化篩選平臺(tái)的選擇

  傳統(tǒng)的方法往往采油工手動(dòng)有限稀釋法來(lái)進(jìn)行篩選,雖然說(shuō)能篩選出單個(gè)細(xì)胞,但是通量較低,操作方法復(fù)雜也容易造成污染。而自動(dòng)化篩選不僅能夠短時(shí)間內(nèi)將成千上萬(wàn)個(gè)單細(xì)胞分離包裹,而且能形成細(xì)胞培養(yǎng)和多個(gè)單細(xì)胞的獨(dú)立體系。不僅能夠大量避免手動(dòng)操作的不足之處,而且能在更大程度上保障其形成單克隆;

  4、細(xì)胞的穩(wěn)定生長(zhǎng)

  因?yàn)榧?xì)胞在個(gè)體中會(huì)受到自身分泌的生長(zhǎng)因子的影響,而培養(yǎng)液中不存在這類因子,需要手動(dòng)加入。而且培養(yǎng)基中培養(yǎng)會(huì)形成一種抑制細(xì)胞生成的物質(zhì),需要去除。滿足培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)的需求,針對(duì)每種獨(dú)特的細(xì)胞株配備合適的培養(yǎng)條件,保證單克隆獲得最佳的存活機(jī)會(huì);

  總的來(lái)說(shuō),穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的過(guò)程中我們需要為其制備做好各種準(zhǔn)備工作,讓其在最佳的環(huán)境下培養(yǎng),同時(shí)去除其中會(huì)產(chǎn)生的不良物質(zhì),以保證細(xì)胞株在最優(yōu)條件下構(gòu)建。只有這樣,產(chǎn)生的細(xì)胞株才能夠在更大程度上達(dá)到我們的需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。