前面我們和大家聊過有關(guān)穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建原理及方法,如果沒有看過,您可以點擊“穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建-構(gòu)建原理及其構(gòu)建方法盤點”進行查看。但是因為篇幅所限,上次沒能聊到有關(guān)穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建方法。所以,今天普健生物在這里就和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細胞株構(gòu)建的幾個常用方法及其適用范圍。
穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建方法主要有三種:
1、單克隆環(huán)法。這個方法多用于針對哪些整合率低卻有需要獲得單克隆株的方法。不過相比其他方法來說,這個方法的工作量相對較小,只需將轉(zhuǎn)染后的細胞按照一定的密度轉(zhuǎn)移到新的細胞皿中,然后采用藥物進行篩選,最后挑選出合適的單克隆細胞株即可。但是也正因為操作過于見到,導致其中容易出現(xiàn)所產(chǎn)生的細胞株不純,最終失去生長上的優(yōu)勢,導致失去穩(wěn)定細胞株;
2、96孔單克隆稀釋法。這個方法同樣適用于整合率低的轉(zhuǎn)染或需要得到但隔開了細胞株的實驗。從理論上來說,這個方法能夠得到非常單一的單克隆抗體,同時可以篩選出懸浮穩(wěn)定細胞株。只不過因為過程繁瑣,所以工作量相對要大一些;
3、逆轉(zhuǎn)錄病毒混合克隆制備法。如果需要制備混合穩(wěn)定株,這個方法就顯得非常的合適了。這個不僅能讓我們在短時間內(nèi)獲得穩(wěn)定細胞株,而且能夠?qū)⑺眉毎♂屢恨D(zhuǎn)移到新的器皿中,最終獲得單克隆細胞株。只不過這個方法需要進行逆轉(zhuǎn)錄,相對來說,技術(shù)更加復雜,需要技術(shù)人員具備一定的實力才行;
當然了,隨著技術(shù)的發(fā)展,有更多的方法被設計出來,能夠應對各種不同的使用場景需求。所以,在后來,我們完全可以選擇一種成本更低工作量更小技術(shù)需求更低的方式。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務,如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。