之前我們和大家聊過穩(wěn)定細(xì)胞株篩選，其實就是從構(gòu)建的穩(wěn)定細(xì)胞株中挑選出穩(wěn)定表達(dá)且目的蛋白質(zhì)量高的細(xì)胞株。今天，我們再和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的常用方法。

　　總共的來說，穩(wěn)定細(xì)胞株因為技術(shù)實力、儀器、原材料以及需求不同，其構(gòu)建方法也是各不相同的，不過，常用的一些方法也大體相同。

　　1. 轉(zhuǎn)染：這是最常用的方法之一，通過將目標(biāo)基因的表達(dá)載體導(dǎo)入到目標(biāo)細(xì)胞中實現(xiàn)。

　　轉(zhuǎn)染的方法一般包括：化學(xué)轉(zhuǎn)染和病毒轉(zhuǎn)染兩種。

　　化學(xué)轉(zhuǎn)染：使用化學(xué)物質(zhì)(例如聚乙烯亞胺、磷脂體等)將表達(dá)載體引入細(xì)胞內(nèi)。

　　病毒轉(zhuǎn)染：使用病毒作為介導(dǎo)體，將表達(dá)載體傳遞到細(xì)胞中。常用的病毒載體包括腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺相關(guān)病毒等。

　　2.電穿孔：通過電脈沖的作用，在細(xì)胞膜上形成臨時的微孔，使表達(dá)載體得以進(jìn)入細(xì)胞。這種方法可以在不使用病毒或化學(xué)物質(zhì)的情況下實現(xiàn)轉(zhuǎn)染。

　　3.瞬時轉(zhuǎn)染：這種方法不涉及穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建，而是將目標(biāo)基因的表達(dá)載體短暫地導(dǎo)入細(xì)胞中，使其在一段時間內(nèi)表達(dá)目標(biāo)基因或蛋白質(zhì)。這可以用于快速評估目標(biāo)基因的功能或進(jìn)行臨時的表達(dá)實驗。

　　在進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建時，我們常常會進(jìn)行相關(guān)的標(biāo)記，以便于在轉(zhuǎn)染后期進(jìn)行相關(guān)的篩選工作，這樣，就能夠更加精確地讓我們獲得穩(wěn)定細(xì)胞株。而且作為現(xiàn)階段使用相對廣泛的一種蛋白表達(dá)技術(shù)，穩(wěn)定細(xì)胞株的重要性是不言而喻的，而且隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，相信在不僅的將來，其使用將會更加的廣泛。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。