抗體測(cè)序在生物行業(yè)中的使用非常的廣泛,它不僅能幫我們更好地進(jìn)出抗體生產(chǎn),也能在極大程度上保障不同批次抗體之間的一致性。不過(guò)對(duì)于單克隆抗體測(cè)序大家又了解多少呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
總的來(lái)說(shuō),單克隆抗體測(cè)序和普通的抗體測(cè)序不存在太大的區(qū)別,通過(guò)對(duì)單克隆抗體蛋白進(jìn)行從頭到尾的測(cè)序,也就是我們常說(shuō)的單克隆抗體從頭測(cè)序操作(很多人會(huì)在這里提出這個(gè)概念,似乎更高大上,其實(shí)就是同一樣操作)。
單克隆抗體測(cè)序的原理其實(shí)就是通過(guò)酶解技術(shù)結(jié)合分辨率的質(zhì)譜和獨(dú)特的數(shù)據(jù)分析來(lái)進(jìn)行相關(guān)序列檢測(cè)活動(dòng),簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是是通過(guò)檢測(cè)串聯(lián)質(zhì)譜中兩個(gè)片段離子之間的質(zhì)量差來(lái)確定蛋白氨基酸殘基的質(zhì)量,然后再沿著蛋白的主鏈來(lái)確定每個(gè)氨基酸,最終獲得氨基酸完整序列的方式。
單克隆抗體測(cè)序的主要流程是什么呢?
1、全序列覆蓋。在進(jìn)行抗體測(cè)序的過(guò)程中,我們需要確保每個(gè)位點(diǎn)的氨基酸有超過(guò)10個(gè)不同肽段的支持,通過(guò)對(duì)氨基酸質(zhì)量的控制,確保每個(gè)質(zhì)譜里都有強(qiáng)力自片段峰證據(jù),這樣才能保證全序列覆蓋;
2、抗體質(zhì)量核對(duì)。對(duì)輕重鏈進(jìn)行測(cè)定,確保其在范圍內(nèi);
3、亮氨酸和異亮氨酸確定。通過(guò)采用一種集成的策略,統(tǒng)計(jì)同源性數(shù)據(jù)的方式,區(qū)分亮氨酸和異亮氨酸;
單克隆抗體測(cè)序的原理其實(shí)并沒(méi)想象中的那么復(fù)雜,但是在日常的測(cè)序?qū)嶒?yàn)中,往往會(huì)遇到這樣或是那樣的問(wèn)題,最終導(dǎo)致測(cè)序結(jié)果不理想。其實(shí)出現(xiàn)這類偏差的原因有很多,主要是因?yàn)橐恍┘?xì)節(jié)方面的操作沒(méi)做好,如果能嚴(yán)格按照步驟,控制好實(shí)驗(yàn)中的每個(gè)因素,序列測(cè)量自然完全不是問(wèn)題了。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供單克隆抗體測(cè)序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。