說到雜交瘤測序,大家或許并不怎么熟悉,但是說到抗體測序的話,相信大家一定會非常的了解。在我們制備單克隆抗體時,常常會使用到雜交瘤技術(shù),制備出的雜交瘤需要盡快凍存,但是,凍存過程中往往會出現(xiàn)失活的現(xiàn)象。所以,我們就需要對篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)測序工作。
經(jīng)過測序后的雜交瘤,能夠知道其完整的序列,后期在制備單克隆抗體的時候,可以通過相關(guān)序列通過重組抗體來制備所需抗體。不僅能解決雜交瘤失活的現(xiàn)象,也能保證抗體不同批次之間的一致性。當(dāng)然了,雜交瘤測序的意義不止于此。
雜交瘤測序的流程是怎樣的呢?
1、雜交瘤細(xì)胞RNA提取。從雜交瘤細(xì)胞中提取完整的RNA序列;
2、RNA反轉(zhuǎn)錄。通過反轉(zhuǎn)錄,獲得完整的DNA序列;
3、獲得抗體輕重鏈基因。通過一系列剪切提取的操作,獲得抗體重鏈/輕鏈的可變區(qū)基因;
4、輕重鏈基因測序。通過抗體測序的手段,測定輕重鏈的基因序列;
5、基因生物學(xué)分析。分析所得基因的生物學(xué)特性,剔除其中非功能性DNA,最終獲得我們所需抗體序列;
6、得到抗體序列;
相對于那些直接對抗體進(jìn)行蛋白分析從而得到基因序列的方式相比,雜交瘤測序所得的基因序列更加的準(zhǔn)確,而且能夠有效避免了因為亮氨酸和異亮氨酸難以區(qū)分的問題。所以,總的來說,雜交瘤測序的準(zhǔn)確性更高,使用起來也更加的方便,也為抗體人源化的實現(xiàn)奠定了更好的基礎(chǔ)。普健生物專業(yè)為廣大該用戶提供雜交瘤測序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。