隨著生物技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的方法開始在抗體藥物生產(chǎn)中投入使用?？贵w藥物開發(fā)是一個(gè)非常繁瑣的過程，而穩(wěn)定細(xì)胞株則幾乎適用于抗體藥物開發(fā)的各個(gè)階段。無(wú)論是重組蛋白、抗體生產(chǎn)，還是檢測(cè)分析和功能性研究，幾乎都適合使用。今天，普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的原理及方法。

　　其實(shí)很多人禁不住地想問：什么是穩(wěn)定細(xì)胞株?它到底是個(gè)什么操作?

　　所謂的穩(wěn)定細(xì)胞株，其實(shí)就是能夠?qū)崿F(xiàn)穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株，基于某一細(xì)胞系構(gòu)建的持續(xù)性過表達(dá)或干擾特定基因的細(xì)胞系。我們知道一般的細(xì)胞是無(wú)法實(shí)現(xiàn)持續(xù)表達(dá)的，而穩(wěn)定細(xì)胞株則能夠通過一定的方法讓細(xì)胞實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定持續(xù)性表達(dá);

　　穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建原理是什么?

　　通過基因技術(shù)將外源DNA或RNA克隆到具備某種抗性的載體上，重組的載體則會(huì)整合到染色體中，并隨著細(xì)胞的分裂穩(wěn)定傳導(dǎo)下去，而后再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選，這樣就能獲得我們所需能夠?qū)崿F(xiàn)穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株;

　　為什么要用到穩(wěn)定細(xì)胞系?

　　1、使用穩(wěn)定細(xì)胞系能夠有效降低頻繁轉(zhuǎn)染的成本;

　　2、可以更好地實(shí)現(xiàn)基因干擾表達(dá)的結(jié)果;

　　3、避免因?yàn)槿藶樵蛩斐傻慕Y(jié)果不準(zhǔn)確的情況;

　　什么時(shí)候需要用到穩(wěn)定細(xì)胞系?

　　1、外源基因需要實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)時(shí);

　　2、需要使用到誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)時(shí);

　　3、目的基因過表達(dá)或需要跟然時(shí)空特異性時(shí);

　　4、細(xì)胞或病毒無(wú)法實(shí)現(xiàn)高傳導(dǎo)效率時(shí);

　　5、需要向動(dòng)物體內(nèi)注射外源表達(dá)片段細(xì)胞時(shí);

　　6、細(xì)胞個(gè)體存在差異時(shí);

　　7、需要將外源片段插入基因組中時(shí);

　　而目前常用的穩(wěn)定細(xì)胞構(gòu)建方法主要有三種：?jiǎn)慰寺…h(huán)法、96孔單克隆稀釋法、逆轉(zhuǎn)錄病毒混合克隆制備法，這些方法我們將在后期和大家具體介紹，本次就不贅述了。

　　總的來(lái)說，穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建能夠在極大程度上避免一些重組蛋白所產(chǎn)生的無(wú)法表達(dá)的情況，以及應(yīng)對(duì)一些細(xì)胞無(wú)法實(shí)現(xiàn)高表達(dá)的情況。當(dāng)然了，穩(wěn)定細(xì)胞株也非萬(wàn)能的，在很多情況下反倒會(huì)造成相關(guān)資源的損耗，所以，需要結(jié)合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇。普健生物專業(yè)為您提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。