單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)大家應(yīng)該了解不少了,如果還不了解,自覺去將我們之前發(fā)的有關(guān)單克隆抗體制備的相關(guān)文章讀一遍。其實(shí)在之前我們也只是和大家簡單聊了聊有關(guān)單克隆抗體制備的常規(guī)步驟,從今天起,我們?cè)俸痛蠹伊牧钠渲械囊恍┰敿?xì)步驟。比如,今天我們就要和大家聊一些常用的免疫方案。
我們知道,免疫是單克隆抗體制備的第一步,它的成功與否直接制約著后面實(shí)驗(yàn)是否要做下去。所以,選擇一個(gè)合適的免疫方案就顯得尤為重要了。我們常用的免疫方案主要有兩種:可溶性抗原和顆粒性抗原。
可溶性抗原(這個(gè)類型的抗原需要進(jìn)行多次免疫才能成功):
初次免疫:將抗原蛋白用等體積的福氏完全佐劑進(jìn)行乳化,達(dá)到滴水不化的程度即可。而后,將其注射到小鼠背部皮下組織中,四周后再進(jìn)行二次免疫;
二次免疫:同樣的蛋白乳化后注入初次劑量的一半即可。這次需要在兩周后對(duì)小鼠進(jìn)行采血,通過離心后測試血清效價(jià),如果已經(jīng)達(dá)到要求則代表免疫成功,如果達(dá)不到要求,則需要進(jìn)行三次免疫;
三次免疫:和首次免疫同樣劑量的蛋白溶液,小鼠融合前3天進(jìn)行加強(qiáng)免疫;
顆粒性抗原:
選擇細(xì)胞和完全佐劑混合,而后對(duì)小鼠進(jìn)行皮下或腹腔注射,2-3周后進(jìn)行重復(fù)注射,3-4天后取脾融合。挑選免疫反應(yīng)較好的動(dòng)物,二次免疫后再次取血檢測;
當(dāng)然了,還可以選用脾內(nèi)注射法或是體外培養(yǎng)法,具體情況結(jié)合自身的情況來進(jìn)行選擇。
單克隆抗體制備的第一步就是免疫,免疫的過程中需要結(jié)合實(shí)際情況進(jìn)行變通,盡量選擇那些身體強(qiáng)勁且無疾病的動(dòng)物,這樣能在更大程度上保證免疫的成功。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。
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