大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)作為五大蛋白表達(dá)系統(tǒng)之一，因?yàn)槠涫褂米钤?、遺傳背景清晰等特點(diǎn)，使得其即便在表達(dá)系統(tǒng)越來(lái)越多的今天，依然是主要的工具。因?yàn)榇竽c桿菌增殖時(shí)間較短，表達(dá)起來(lái)非常的快捷，一般的重組蛋白在大腸桿菌中一周之內(nèi)就能表達(dá)成功。那么，大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)還有什么其他特點(diǎn)呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。

　　1、可形成包涵體

　　一般來(lái)說(shuō)，非真核生物表達(dá)的蛋白都不會(huì)形成包涵體，但是，大腸桿菌這類的過(guò)表達(dá)原核生物會(huì)形成包涵體，而且在大腸桿菌中，蛋白修飾后翻譯、折疊的效率要比真核細(xì)胞高10倍以上，從而促進(jìn)包涵體的形成。

　　包涵體會(huì)在極大程度上影響可溶性活性蛋白的產(chǎn)生，但也因?yàn)槿绱?，使得其不易被蛋白酶降解，從而減少被其他蛋白污染的發(fā)生。當(dāng)然了，通過(guò)一定的手段，也可以將包涵體再折疊成可溶性蛋白;

　　2、通過(guò)溫度來(lái)減少包涵體的形成

　　將溫度保持在15-30度之間，能夠形成更多可溶性蛋白的同時(shí)，盡可能少地形成包涵體。據(jù)研究顯示，這個(gè)區(qū)間的溫度可能會(huì)在一定程度上降低蛋白的轉(zhuǎn)率、折疊的效率，從而促進(jìn)蛋白的正確折疊。而且這個(gè)溫度下，能夠有效降低蛋白酶的活性，更大可能性地保持蛋白活性;

　　3、可添加融合標(biāo)簽提高重組蛋白可溶性

　　和其他重組蛋白表達(dá)方式一樣，在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中，我們可以適當(dāng)?shù)丶尤胍恍┤诤蠘?biāo)簽來(lái)促進(jìn)蛋白的可溶性。同時(shí)，可以通過(guò)精確地對(duì)融合標(biāo)簽進(jìn)行切除、融合等手段，有效控制蛋白的制備;

　　4、形成二硫鍵

　　一般來(lái)說(shuō)，大腸桿菌因?yàn)橛卸蜴I氧化還原酶的催化作用，使得其為大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)二硫鍵唯一形成的場(chǎng)所。所以，我們可以通過(guò)多大腸桿菌的基因組進(jìn)行修改，從而在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成一個(gè)更好的二硫鍵形成環(huán)境;

　　5、可翻譯后修飾

　　相對(duì)其他表達(dá)系統(tǒng)來(lái)說(shuō)，大腸桿菌對(duì)蛋白翻譯后修飾的能力有限，需要有針對(duì)性地進(jìn)行優(yōu)化;

　　所以，對(duì)于一個(gè)表達(dá)系統(tǒng)而言，其表達(dá)的蛋白是否高質(zhì)量，更多程度上取決于蛋白本身特性，只有針對(duì)相對(duì)合適的表達(dá)系統(tǒng)，才能實(shí)現(xiàn)高表達(dá)、高質(zhì)量的蛋白產(chǎn)品，因?yàn)閷?duì)于一個(gè)表達(dá)系統(tǒng)來(lái)說(shuō)，其一定存在優(yōu)勢(shì)和不足之處。所以，如果想要實(shí)現(xiàn)蛋白的高質(zhì)量表達(dá)，合適的表達(dá)系統(tǒng)選擇是首要的。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供大腸桿菌蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。