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真核蛋白表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)蛋白時表達(dá)量低的原因分析

發(fā)表時間:2023-06-01 訪問次數(shù):1632

  隨著真核表達(dá)系統(tǒng)的出現(xiàn),在極大程度上提升了蛋白的表達(dá),不僅讓蛋白表達(dá)量更高,更是提升了蛋白的特異性和結(jié)合力。可以說,真核表達(dá)系統(tǒng)是蛋白表達(dá)史上的一個重大進(jìn)步。但是,因為其操作相比原核表達(dá)系統(tǒng)來說,更加的復(fù)雜,以及一些細(xì)胞本身特性,使得其蛋白表達(dá)低。那么,具體原因有哪些呢?今天,普健生物就和大家具體聊聊。

  1、轉(zhuǎn)錄水平本身就低

  其實就是DNA轉(zhuǎn)錄成RNA時,其轉(zhuǎn)率效率較低的原因。在真核生物中,因為轉(zhuǎn)率因子的缺失和不足,導(dǎo)致其轉(zhuǎn)率水平很低。這個時候,我們可以考慮通過添加相關(guān)轉(zhuǎn)率因子來提升其轉(zhuǎn)化效率;

  2、翻譯效率低下

  這個過程其實就是RNA翻譯成蛋白序列的過程。同樣,因為蛋白翻譯因子缺失或不足,導(dǎo)致其效率低的情況;

  3、蛋白穩(wěn)定性低

  所謂的蛋白穩(wěn)定性,其實就是蛋白在細(xì)胞內(nèi)的生命周期。我們知道,細(xì)胞內(nèi)存在蛋白酶作用過于強烈或是蛋白修飾不足的原因,就會造成蛋白不穩(wěn)定的情況;

  4、信號肽問題

  有些時候,因為構(gòu)建的信號肽問題,使得蛋白表達(dá)量低,去掉信號肽后,表達(dá)量將得到提升。當(dāng)?shù)鞍妆磉_(dá)量低時,其他辦法的無效時,可以考慮去除信號肽試試;

  當(dāng)然了,真核蛋白表達(dá)量低的原因還有很多,除了我們說的如上幾種方式外,還有很多其他原因,比如操作失誤、溫度、pH值不適合等一列的原因。所以,我們在進(jìn)行蛋白表達(dá)的過程中,一定要嚴(yán)格按照實驗標(biāo)準(zhǔn)來執(zhí)行,這樣才能在更大程度上保障蛋白的表達(dá)。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)定制服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。