在蛋白抗體表達時,我們常常要將一段基因插入到合適的載體中,而后導(dǎo)入宿主細胞后表達出蛋白,這個方法稱為重組蛋白表達技術(shù)。通過宿主來劃分,我們將其分為原核表達和真核表達系統(tǒng)兩種,根據(jù)目的蛋白的性質(zhì),我們選擇合適的方法來進行表達。那么,到底什么是原核表達系統(tǒng)和真核表達系統(tǒng)呢?今天,普健生物就和大家具體聊聊。
所謂的原核表達,廣義地來說,就是指發(fā)生在原核生物內(nèi)的基因表達。而在生物工程中,我們將那些通過基因克隆技術(shù)將外源基因?qū)氲皆松锛毎麅?nèi),而后構(gòu)建表達系統(tǒng)表達蛋白的方式稱為原核表達。
而真核表達,顧名思義,將重組基因序列在真核細胞中表達的方式??偟膩碚f,原核表達在原核細胞中表達,真核表達是在真核細胞中實現(xiàn)蛋白表達的方式;
原核表達和真核表達的優(yōu)缺點各有哪些?
原核表達能夠在短時間內(nèi)獲得所需蛋白,而且需投入的成本較低,操作簡便,所表達的蛋白量也相對更高。但是蛋白無法進行翻譯后修飾的操作,所以目的蛋白常常會以包涵體的形式存在,使得后期的純化工作也變得更加的困難。同時因為其翻譯后修飾的體系不太完善,無法影響其表達產(chǎn)物的生物活性,而且還會面臨內(nèi)毒素的影響;
真核表達通常會使用酵母、昆蟲、動物和哺乳動物細胞進行表達,所以,其可以根據(jù)生物蛋白與靶蛋白特異性來設(shè)計,翻譯后修飾技術(shù)也非常完善,使得表達的蛋白具備更高的生物活性。但是,真核表達系統(tǒng)的技術(shù)要求更高,投入成本也更大;
當(dāng)然了,并不是說原核表達不如真核表達,針對不同的需求時,真核系統(tǒng)不一定能滿足我們的需求。在選擇表達系統(tǒng)的時候,我們需要綜合考慮各種因素,比如蛋白的性質(zhì)、我們所具備的實驗條件、能夠承受的生產(chǎn)升本、生產(chǎn)的安全性等等,綜合考慮這些因素后,再選擇最合適的