噬菌體展示技術(shù)是一種基于定向化技術(shù)的高通量篩選技術(shù),它能在極大程度上定向技術(shù)在抗體多肽的改造和篩選方面的應(yīng)用,實現(xiàn)外源肽或蛋白基因與噬菌體上特定蛋白融合表達的新技術(shù)。隨著噬菌體展示技術(shù)的不斷發(fā)展,其優(yōu)勢得到了廣泛的認知,在實驗室中的使用也愈發(fā)的頻繁。
那么,什么是噬菌體展示技術(shù)呢?
就理論而言,噬菌體展示相對來說非常的簡單,就是通過將外源肽段和噬菌體的衣殼蛋白融合展示與噬菌體表面,然后通過篩選及富集等一系列的技術(shù),提取出我們所需要的蛋白產(chǎn)品。而且噬菌體展示技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對人和其他動物的B細胞抗體庫進行體外篩選,能夠很好地避開免疫和細胞融合等步驟,在極大程度上縮短了實驗的周期,并且增加了其穩(wěn)定性。因為噬菌體展示技術(shù)具備篩選容量大、可發(fā)酵生產(chǎn)、操作簡單等一系列的優(yōu)勢,使得它在之后的使用中變得越發(fā)的廣泛。
噬菌體展示技術(shù)的優(yōu)勢體現(xiàn)在哪些方面?
1、固相和液相噬菌體展示文庫篩選經(jīng)驗豐富,可自動化進行噬菌體展示高通量篩選,實現(xiàn)快速交付;
2、高達1010以上的天然抗體文庫庫容以及107以上的免疫抗體文庫庫容;
3、通過先進的親和力檢測技術(shù),可以深入地檢測其生物信息,從而選擇出最佳的人源框架區(qū)序列,快速且高通量地篩選出高親和力、高產(chǎn)量的人源化抗體
4、片段插入率高,可達90%以上;
噬菌體抗體庫構(gòu)建:
1、噬菌體展示技術(shù)的使用流程
2、隨機多肽/蛋白多肽核酸序列合成
3、組織RNA抽提及cDNA制備目的基因/抗體基因克隆基因插入載體電轉(zhuǎn)大腸桿菌抗體庫庫容及多樣性檢測
抗體庫篩選:
靶分子暴露靶分子與噬菌體結(jié)合洗脫擴增得到篩選到的基因及表達產(chǎn)物。
總的來說,噬菌體展示技術(shù)能夠帶來很多傳統(tǒng)蛋白表達方式所無法達到的效果,而且因為其優(yōu)勢,使得其在生產(chǎn)一些蛋白的時候,能減少中間過程,降低其生產(chǎn)周期。隨著噬菌體展示技術(shù)的不斷提升,相信未來會有更多更迅速的方法產(chǎn)生蛋白。