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什么是大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)?它的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在哪些方面?

發(fā)表時(shí)間:2022-11-14 訪問(wèn)次數(shù):2199

  說(shuō)到大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng),相信大家都不會(huì)陌生,因?yàn)橹灰枰磉_(dá)蛋白產(chǎn)品,第一個(gè)想到的,基本上就是大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌是第一種用來(lái)表達(dá)蛋白的細(xì)菌,因?yàn)榇竽c桿菌存在于生物腸道中,大部分菌株是無(wú)害的,所以使用最為廣泛。今天,普健生物就和大家具體聊聊大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)。

  大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的組成:表達(dá)載體、外源基因及表達(dá)宿主菌

  1、表達(dá)載體

  一般來(lái)說(shuō),一個(gè)完整的質(zhì)粒表達(dá)系統(tǒng)需要具備復(fù)制起點(diǎn)、啟動(dòng)子、目的基因、篩選標(biāo)記以及終止子;

  2、外源基因

  原核基因可以直接在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)表達(dá),真核則需要注意(因?yàn)檎婧嘶蚝袃?nèi)含子,不能對(duì)nRNA進(jìn)行剪切,所以,只能用cRNA進(jìn)行表達(dá))。一般來(lái)說(shuō),蛋白在大腸桿菌中會(huì)呈現(xiàn)不溶性的包涵體顆粒以及可溶性的蛋白,我們需要根據(jù)具體情況進(jìn)行具體的處理;

  3、表達(dá)宿主菌

  大腸桿菌蛋白表達(dá)最重要的就是宿主細(xì)胞的選擇,我們需要結(jié)合宿主細(xì)胞的特性以及蛋白的特性來(lái)進(jìn)行選擇。一般選擇濃度高、成本低、不致病不產(chǎn)生內(nèi)毒素、發(fā)熱量低需氧量小等方面的宿主;

  大腸桿菌的優(yōu)勢(shì)以及不足之處:

  因?yàn)槭亲钤缬脕?lái)表達(dá)蛋白的宿主,所以,人們對(duì)大腸桿菌的研究非常透徹,所以其表達(dá)背景清楚、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)單、培養(yǎng)周期短、抗污染能力強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)非常的明顯。但是,也存在著一定的不足,比如不能進(jìn)行翻譯后修飾,且含有大量的內(nèi)毒素。畢竟一種絕對(duì)完美的蛋白表達(dá)系統(tǒng)是不可能存在的,能夠滿足一定環(huán)境下的需求即可。

  大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)作為最開始用來(lái)表達(dá)蛋白的系統(tǒng),其存在的一些優(yōu)勢(shì)不是其他系統(tǒng)可以比擬的,雖然現(xiàn)階段發(fā)展出了很多表達(dá)系統(tǒng),但是其依然占據(jù)了一席之地。而且大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)也含有很多不同的表達(dá)宿主,能夠滿足各種不同的需求,而且生產(chǎn)成本低,是工業(yè)蛋白制備的主要選擇。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。